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Analisi morfologica delle cellule del midollo osseo con conta dei mielogrammi


Lo studio dei mielogrammi dovrebbe iniziare con la visualizzazione dei preparati cervicali con un piccolo ingrandimento del microscopio. Ciò consente di determinare la qualità degli strisci, della cellularità del midollo osseo, per rilevare gruppi di cellule atipiche. Dopo aver visto lo striscio sotto un piccolo aumento, viene applicata una goccia di olio per immersione e, con un notevole aumento, procedere alla differenziazione degli elementi sagomati. Viene eseguito il conteggio differenziale di almeno 500 cellule del midollo osseo e viene calcolata la percentuale di ciascun tipo di cellula. Il conteggio può essere fatto in due modi. Secondo il metodo di E. A. Kost (1952), le cellule di leucopoiesi ed eritropoiesi sono considerate separatamente. Secondo il metodo di N. A. Arinkin, tutte le cellule del midollo osseo vengono contate in successione e viene calcolata la percentuale di ogni tipo di cellule (per questo sono necessarie due macchine di calcolo).
Morfologia delle cellule eritroidi
Gli eritroblasti sono cellule progenitrici morfologicamente diverse degli elementi del germe eritroide. Queste sono grandi cellule rotonde con un diametro di 15-25 micron o circa 20 micron e più, hanno un grande nucleo ovale o circolare, che occupa gran parte della cellula ed è dipinto in un colore rosso-viola scuro. Il nucleo è caratterizzato da un delicato intreccio di fili di cromatina, uno o più nucleoli (fino a quattro) di colore blu o blu scuro e talvolta difficili da distinguere. Il citoplasma ha varie dimensioni, un colore blu intenso con una sfumatura viola, con una zona di illuminazione attorno al nucleo in alcune cellule. Il mielogramma contiene normalmente 0,2-1,1% di eritroblasti.
I proconormociti sono morfologicamente vicini agli eritroblasti, ma differiscono da essi per un valore inferiore (12-18 micron), una struttura più grossolana del nucleo (sono visibili ampie porzioni di ossicromatina) e l'assenza di nucleoli. La forma della cella è rotonda o ovale. Il citoplasma di notevoli dimensioni, basofilo, è di colore blu. Il mielogramma normalmente contiene 0,1-1,2% di pronorociti.
Nell'analisi di midollo osseo puntato normociti isolati di tre tipi.
Normociti basofili hanno solitamente dimensioni di 10-18 micron. Il nucleo è rotondo, denso, non contiene un nucleolo. La struttura del nucleo è più grossolana di quella del pronorocita, con una chiara separazione in basichromatina e ossicromatina, con il risultato che il nucleo ha una struttura simile a una ruota. Il citoplasma è basofilo, scuro o blu chiaro.
Il mielogramma contiene normalmente 1,4-4,6% di normociti basofili.
I normociti policromatofili sono di dimensioni più piccole di quelli basofili - 9-12 micron. La forma è rotonda o ovale. Il nucleo è stretto. La struttura a ruota del nucleo è preservata, ma in essa sono già annotati i cambiamenti picnotici, espressi in misura maggiore o minore. Il citoplasma delle cellule, che accumula l'emoglobina, percepisce i coloranti acidi e, a seconda del grado di saturazione con l'emoglobina, durante la colorazione assume un colore da grigio-blu a rosa-grigiastro - policromatofilia.
Il mielogramma di una persona sana contiene 8,9-16,9% di normociti policromatofili.
I normociti ossifilici sono i più piccoli dei normociti, misurano 7-10 micron. A seconda del grado di maturazione cellulare, il rapporto citoplasma nucleare varia. Nelle cellule più mature, il nucleo occupa meno spazio a causa del restringimento o picnosi. Il nucleo è denso, compatto, grosso-picnic, situato eccentricamente. Il citoplasma è ortocromico, rosa, ben saturo di emoglobina, a volte contiene particelle sciolte vicino al nucleo - il vitello di Jolly. Nella fase del normocita ossifilico, il nucleo viene espulso e la cellula viene trasformata in un eritrocita privo di nucleari. Parallelamente al processo di conversione dei normociti nell'eritrocita, l'emoglobina si accumula nel citoplasma.
Il mielogramma normalmente contiene 0,8-5,6% di normociti ossifilici.
Lo stadio intermedio tra il normocita oxyphilic e l'erythrocyte è il retikulocyte.
La morfologia dei reticolociti e degli eritrociti è presentata nelle sezioni precedenti.
La morfologia delle cellule germinali granulocitarie I mieloblasti sono le cellule madri della serie dei granulociti, spesso circolari, meno spesso di forma poligonale, 15-16 μm o 15-20 μm di dimensione. Indipendentemente dalla loro dimensione, le cellule si distinguono per una delicata struttura dei nuclei con una distribuzione uniforme dei filamenti di cromatina che formano la rete a foglie sottili. Il nucleo contiene 2-5 nucleoli colorati in blu o ciano. Il citoplasma blu circonda il nucleo con una piccola cintura, contiene una quantità moderata di granularità azurofila non specifica, non sempre chiaramente visibile, che presenta sfumature transitorie dal rosso al viola; Si trovano bastoni di Auer, ci può essere una zona perinucleare di illuminazione. In tutti i mieloblasti, il rapporto tra nucleo e citoplasma è significativamente spostato a favore del nucleo. Nel midollo osseo normale, i mieloblasti eosinofili e basofili, di regola, non sono stati trovati. Mielogramma di una persona sana contiene 0,2-1,7% di mieloblasti.
promielociti
Come conseguenza della divisione mitotica e della differenziazione, i mieloblasti passano allo stadio successivo dello sviluppo: i promielociti. Queste cellule in una certa misura ripetono ancora le caratteristiche morfologiche dei mieloblasti. Promielocita di qualsiasi riga è la più grande cella, raggiungendo un diametro di 25 micron. Promielociti ha il grano più abbondante. È necessario notare la diversità delle dimensioni delle cellule e del citoplasma, nella struttura e nella forma del nucleo, non sempre chiaramente visibili nucleoli o loro residui, nel grado di saturazione del citoplasma con granularità polimorfica. I nuclei dei promielociti possono essere rotondi, ovali, a forma di fagiolo, spesso situati eccentricamente. La struttura dei filamenti di cromatina è più grossolana di quella dei mieloblasti. Talvolta i nuclei acquisiscono una struttura transitoria nella direzione della fase successiva della differenziazione - mielociti: compare un ispessimento dei fili della cromatina, il nucleo perde la sua delicata struttura uniforme e reticolazione. Il citoplasma di varie larghezze, blu, a volte blu nelle cellule più giovani, blu-rosato in quelli più maturi, può essere fumoso, con spiccata granularità azurofila (la cellula è come se cosparsa di pepe), che si trova sul nucleo e nel citoplasma. Il mielogramma di una persona sana contiene 1,0-4,1% di promielociti neutrofili.
mielociti
I mielociti raggiungono una dimensione di 13-15 micron e più, i nuclei possono essere rotondi, ovali, con contorni irregolari, situati centralmente o eccentricamente. La struttura del nucleo è caratterizzata dall'alternanza di siti scuri (basichromatin) e luce (ossicromatina), che distingue i mielociti dai promielociti e dal mieloblasto. I mielociti materni hanno una struttura nucleica più delicata. Le singole cellule contengono singoli nucleoli. Il rapporto citoplasmatico nucleare è spostato a favore del nucleo. Il citoplasma nei mielociti neutrofili maturi è di colore rosaceo-violetto e blu basofilo ed eosinofilo. In alcune cellule, il citoplasma ha siti basofili lungo la periferia che si alternano con normali siti neutrofili. La granularità può essere neutrofila, eosinofila e basofila. La granularità neutrofila ha varie dimensioni. La granulazione eosinofila riempie il citoplasma della cellula, ha granuli della stessa dimensione, giallo-rosato o giallo-dorato. I mielociti basofili contengono una granularità basofila di varie dimensioni, che non riempie molto densamente il citoplasma. Il mielogramma di una persona sana contiene il 7.0-12.2% di mielociti neutrofili, 0,6-1,0% - eosinofili, 0-0,2% - basofili.
metamielociti
I metamelociti neutrofili hanno una dimensione cellulare di 10-15 micron. Noccioli a forma di ferro di cavallo o a forma di fagiolo. La struttura del nucleo è più grossolana di quella dei mielociti, non c'è il nucleolo. Il rapporto citoplasmatico nucleare è 1: 1. Il citoplasma del metamyelocita neutrofilo ha un colore rosato, eosinofilo in blu pallido, basofilo in viola bluastro. La grana è colorata a seconda del tipo di metamyelocyte - neutrophilic, eozinofilny, basofilico. Il mielogramma di una persona sana contiene 8,0-15,0% di metamelociti neutrofili e 0,2-1,5% di eosinofili.
Granulociti a bande e segmentati
La morfologia dei granulociti segmentati e segmentati è presentata sopra.
Il mielogramma di una persona sana contiene:
- 12,8-23,7% di neutrofili stabici;
- 13,1-24,1% dei neutrofili segmentati;
- 52,7-68,9% di tutti gli elementi neutrofili;
- 0,5-5,8% di tutte le generazioni di eosinofili;
- 0-0,5% dei basofili di tutte le generazioni.
La morfologia delle cellule monocitiche
Monoblasty
Le cellule madri della serie monocitica sono monoblasti. Si tratta di cellule grandi, rotonde o poligonali, con una dimensione superiore a 20 micron, il nucleo è grande, di colore pallido, spesso arrotondato o arrotondato - allungato, a volte a forma di fagiolo, lobato, meno variabile del nucleo dei monociti. In termini di struttura delicata, reticolare e presenza di 2-3 nucleol ben visibili, il nucleo del monoblasto è morfologicamente stretto al nucleo dei mieloblasti. Il citoplasma è più ampio, basofilo leggero, che distingue i monoblasti dai mieloblasti.
promonocyte
Promonociti della stessa dimensione dei monoblasti. Più grande che nei monoblasti, il nucleo ha una forma ondulata e una curvatura dolorante. Ci sono addensamenti nei filamenti cromatinici dei nuclei, non ci sono nucleoli; Il citoplasma, come nei monoblasti, è colorato in diversi toni basofili, spesso più chiari, di colore blu grigiastro, a volte blu, e può contenere granulosità azurofila fine.
La morfologia dei monociti è descritta sopra. Il mielogramma di una persona sana contiene lo 0,7-3,1% di monociti.
La morfologia delle cellule della serie linfoide
linfoblasti
La divisione delle cellule linfoidi in base al grado di maturità sulla base delle caratteristiche morfologiche è condizionata. Si nota la somiglianza morfologica esterna degli elementi linfoidi del sangue e degli organi che formano il sangue.
I linfoblasti sono cellule progenitrici della serie linfoide. Le dimensioni raggiungono 20-22 micron. Il nucleo occupa la maggior parte della cellula e ha una forma rotonda o leggermente ovale. La struttura del nucleo è un reticolo morbido (anche se più grossolano, nodoso rispetto al nucleo dei mieloblasti), con una distribuzione corretta e uniforme dei fili della cromatina.
Principalmente i fili della cromatina formano addensamenti. Le aree scure di basichromatin si trasformano impercettibilmente in ossicromatina. Nel nucleo vi è uno (raramente 2-3) grande nucleolo, meno nettamente delimitato rispetto a quello dei mieloblasti, situato centralmente o eccentricamente. Il citoplasma basofilo, relativamente leggero, circonda il nucleo con una stretta fascia, attorno al nucleo vi è una zona periferica più chiara, che non sempre diventa uniformemente più intensamente colorata. La granularità nel citoplasma non lo è.
prolinfociti
I prolinfociti sono leggermente più piccoli dei linfoblasti, ma più grandi dei linfociti: 12-15 micron. Il nucleo è rotondo o ovale, con una struttura grossolana, di tanto in tanto con una leggera rientranza, occupa la maggior parte della cellula, è di colore più chiaro rispetto ai linfociti, ma più scuro rispetto ai linfoblasti. I filamenti di Basichromatin sono talvolta raccolti in aree densamente più grandi, ma sono disposti in modo più uniforme, senza grumi grandi rispetto ai linfociti. Al centro del nucleo, la maggior parte delle cellule ha un'illuminazione simile al nucleolo, ma non ci sono nucleoli chiari. Il citoplasma dei pro-linfociti, come il citoplasma dei linfociti, circonda il nucleo sotto forma di una cintura stretta o più ampia, è dipinto in un colore azzurro, e vi è illuminazione vicino al nucleo - la zona perinucleare. Talvolta nella granularità scarsa del citoplasma sotto forma di grani grandi, di dimensioni non uniformi, si riscontra granularità azurofila. Nel sangue periferico e nel midollo osseo di una persona sana si possono trovare singoli prolinfociti.
linfociti
La morfologia dei linfociti è descritta sopra. Nel mielogramma di una persona sana, il 4,3-13,7% dei linfociti.
Morfologia delle cellule al plasma Le cellule plasmatiche derivano dai linfociti B, subiscono diverse fasi di sviluppo da un plasma plasmatico a un plasmocita e sono coinvolte nella sintesi delle immunoglobuline.
Plazmoblasty
I plasmoblasti hanno una dimensione di 16-30 micron. Il nucleo occupa la maggior parte della cellula, si trova al centro o leggermente eccentrico, ha una struttura delicata, ricca di basichromatin, che ha una tendenza alla posizione radiale. Nel nucleo possono essere presenti uno o più nucleoli grandi (1-2), non sempre chiaramente visibili. Citoplasma di dimensioni notevoli, blu intenso. Intorno al nucleo c'è una zona caratteristica dell'illuminazione. Normalmente, non ci sono plasmablasts nel midollo osseo.
Protoplasmociti (cellule di Türk)
Protoplasmociti (cellule turche) sono
forme transizionali da plasmablast a plasmacellule. Sono di dimensioni maggiori rispetto alle plasmacellule mature, raggiungendo talvolta un diametro di 20 μm. Il nucleo occupa la parte malata della cellula, si trova più spesso eccentrico, ricco di basichromatin. In alcune parti del nucleo si conserva una delicata struttura a rete. Il nucleo può contenere un piccolo nucleolo. Il citoplasma è allungato, bruscamente basofilo, a volte con una tonalità viola, c'è illuminazione attorno al nucleo, ci possono essere vacuoli.
Cellule al plasma (cellule di Wein)
Cellule al plasma (cellule Unna) - plasmacellule mature, di forma e dimensioni variabili - da 8 a 20 micron. Il nucleo è quasi costante; cambia, di regola, il valore del citoplasma. Il nucleo è rotondo, spesso ovale, posizionato in modo eccentrico, ha una caratteristica struttura a ruota. Il citoplasma si tinge di blu intenso con un'illuminazione chiara attorno al nucleo. Vi sono grandi cellule con un coplasma più chiaro (grigio-blu) e una zona perinucleare meno pronunciata. Nel citoplasma possono esserci vacuoli di varie dimensioni, localizzati, di regola, nella parte periferica della cellula e dandogli una struttura cellulare. Spesso ci sono plasmacellule multi-core contenenti 2-4 o più nuclei della stessa dimensione o citoplasma e dimensioni diverse con vacuolizzazione ben espressa, che rende le plasmacellule simili ai lipofagi.
Nel normale punto medio del midollo osseo si trovano le plasmacellule mature in una quantità dello 0,1-1,8%. Non ci sono cellule plasmatiche nel sangue periferico.
La morfologia delle cellule serie megacariocitiche
megacarioblasti
Megakaryoblasts - cellule progenitrici di una serie megacariocitica di circa 20 micron di dimensione. Il nucleo è rotondo, con una struttura di cromatina piuttosto grossolana, piuttosto grossolana, a volte intrecciata a forma di spirale, i nucleoli sono spesso visibili. Il citoplasma è basofilo, senza venature e ha l'aspetto di un bordo stretto. I contorni cellulari sono spesso disomogenei, con processi del citoplasma e formazione di placche blu.
Promegakariotsity
Promegacariociti sono più grandi dei megacarioblasti. Il nucleo è grande, ha una struttura più grossolana e una tendenza al polimorfismo - depressioni a forma di alloro, linee di nucleazione del nucleo, ecc. Il citoplasma è basofilo, privo di grana, sotto forma di bordo stretto, a volte con processi e formazione di placche blu.
megacariociti
I megacariociti basofili hanno dimensioni più grandi dei promegacariociti e due volte più grandi dei megacarioblasti. Il nucleo può essere desiderato, con una struttura delicata di basichromatin o più maturo, multi-lobato. Il citoplasma di colore blu, a volte con granularità azurofila, ha l'aspetto di un bordo stretto.
I megacariociti policromatofili sono cellule giganti con un diametro di 40-50 micron. Il nucleo è multi-lama, a volte minimizzato sotto forma di una palla o è costituito da singole sfere. La struttura del nucleo è ruvida, il fenomeno delle rughe è spesso osservato - picnosi. Il rapporto citoplasmatico nucleare è spostato a favore del citoplasma, che è un'ampia zona di colore azzurro con granulosità di varie sfumature (rossastro, viola chiaro, viola), che non è sempre uniformemente distanziata. In alcune parti della cellula, situate più vicino alla periferia, ci sono gruppi di piccoli granuli circondati da un bordo di citoplasma blu. A volte l'intero citoplasma è pieno di tali grani. Per dimensioni e struttura, sono simili alle piastrine del sangue formate. A volte nelle cellule è possibile osservare la separazione delle piastrine finite dal citoplasma.
Megacariociti ossifilici - più grandi delle precedenti cellule, di 60-70 μm di diametro, contengono un nucleo multilobare, a volte costituito da frammenti. Abbastanza spesso ci sono cellule multinucleate. Il nucleo è di colore viola scuro, acutamente pyknotichno. Il citoplasma forma un'ampia area, ha una colorazione rosa e contiene abbondanti venature rossastre.
Le forme involutive si formano come risultato della maturazione dei megacariociti con una graduale separazione del citoplasma e del nucleo durante la formazione delle piastrine. Queste cellule hanno un nucleo sparso polisegmentato e un citoplasma rosa pallido con una granulosità polverosa sottile.
Le forme gonucleari possono essere formate da megacariociti involutivi a seguito della loro disintegrazione intensiva in piastre. In questo caso, i nuclei liberi hanno residui del citoplasma.
piastrine
La descrizione morfologica delle piastrine è presentata sopra.
Significato clinico
Un aumento delle cellule esplosive con la comparsa di forme polimorfiche, malformate con atipi di nuclei, nucleoli ingranditi si osserva nella leucemia acuta. Nel mielogramma, il numero di neutrofili maturi e di eritrocariociti è ridotto. Un aumento di elementi mieloidi, principalmente a causa di forme immature, combinato con un leggero aumento dei mieloblasti, dei promielociti, un aumento del rapporto leucotroblastichesky e diminuzione dei globuli rossi, è un segno di mieloproliferazione ed è particolarmente pronunciato nella leucemia mieloide cronica.
Un aumento degli elementi mieloidi e delle loro forme immature è spesso accompagnato da intossicazione, processi infiammatori acuti, infezioni purulente e può essere in stato di shock, perdita di sangue acuta, ematosarcoma, tubercolosi, cancro.
Увеличение лимфоидных элементов в основном за счет зрелых, появление голоядерных форм при значительной редукции эритрокариоцитов является признаком лимфопролиферативных заболеваний (хронический лимфолейкоз, макроглобулинемия Вальденстрема). Увеличение плазматических клеток с изменением их морфологических черт (полиморфизм, двухьядерные формы, изменение окраски цитоплазмы и пр.) характерно для миеломной болезни.
Изменение эритрокариоцитов с резким увеличением их числа и уменьшением лейкоэритробластического соотношения наблюдается при анемиях (постгеморрагические, гемолитические). Изменение морфологических черт эритроидных элементов, появление мегалобластов разных генераций, крупных форм и нейтрофильных миелоцитов, метамиелоцитов, гиперсегментированных нейтрофилов свидетельствует о В12- или фолиево-дефицитных анемиях.
Уменьшение эритроидных форм на фоне снижения общего числа миелокариоцитов с небольшим увеличением бластных клеток, лимфоцитов, плазматических клеток часто может быть проявлением гипопластической анемии. Эти формы малокровия могут протекать и с увеличением эритроидных клеток, появлением атипичных эритробластов. Обнаружение в миелограмме повышенного количества эозинофилов свидетельствует об аллергии, может быть при глистной инвазии, эозинофильных инфильтратах, злокачественных новообразованиях, эозинофильной гранулеме и др. Увеличение моноцитных клеток наблюдается при хроническом моноцитарном лейкозе, хроническом миеломоноцитарном лейкозе, инфекционном мононуклеозе, при хронических инфекциях. Тучные клетки могут обнаруживаться в миелограмме при пигментной крапивнице, в редких случаях тучноклеточного лейкоза (мастоцитома).
Трепанобиопсия костного мозга
Трепанобиопсию костного мозга проводят для диагностики алейкемических форм лейкозов, эритремии, миелофиброза и других миелопролиферативных и лимфопролиферативных заболеваний, при подозрении на гипопластические анемии, метастазы рака в костный мозг и при неясных изменениях пунктата костного мозга. Приготовление срезов костного мозга, их окраску осуществляют в гистологической лаборатории по правилам гистологической обработки костных тканей.

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Морфологический анализ клеток костного мозга с подсчетом миелограммы

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