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Analisi morfologiche delle cellule del midollo osseo con conteggio dei mielogrammi


Lo studio dei mielogrammi dovrebbe iniziare con la visualizzazione dei preparati a colori sotto un piccolo ingrandimento del microscopio. Ciò consente di determinare la qualità degli strisci, la cellularità del midollo osseo, per rilevare gruppi di cellule atipiche. Dopo aver visto lo striscio sotto un piccolo aumento, viene applicata una goccia di olio per immersione e, sotto un grande aumento, iniziano a differenziare gli elementi formati. Viene eseguito il conteggio differenziale di almeno 500 cellule di midollo osseo e viene calcolata la percentuale di ciascun tipo di cellula. Il conteggio può essere effettuato in due modi. Con il metodo di E. A. Cost (1952), le cellule della leucopoiesi e dell'eritropoiesi vengono contate separatamente. Con il metodo di N. A. Arinkin, tutte le cellule del midollo osseo sono considerate in una riga e viene calcolata la percentuale di ciascun tipo di cellula (per questo sono necessarie due macchine di conteggio).
Morfologia delle cellule eritroidi
Gli eritroblasti sono cellule madri morfologicamente distinte di elementi germinali eritroidi. Queste sono grandi cellule rotonde con un diametro di 15-25 micron o circa 20 micron o più, hanno un grande nucleo ovale o rotondo, che occupa la maggior parte della cellula, colorato in un colore rosso-violetto scuro. Il nucleo è caratterizzato da un delicato plesso di filamenti di cromatina, uno o più (fino a quattro) nucleoli, colorati in blu o blu scuro e talvolta difficili da distinguere. Il citoplasma ha varie dimensioni, un colore blu intenso con una sfumatura violetta, con un'area di illuminazione attorno al nucleo in alcune cellule. Il mielogramma normalmente contiene lo 0,2-1,1% di eritroblasti.
I pronormociti sono morfologicamente vicini agli eritroblasti, ma differiscono da essi in una dimensione più piccola (12-18 micron), una struttura più ruvida del nucleo (sono visibili ampie aree di ossitromatina) e l'assenza di nucleoli. La forma della cellula è rotonda o ovale. Il citoplasma di dimensioni significative, basofilo, diventa blu. Il mielogramma normalmente contiene pronormociti 0,1-1,2%.
Quando si analizza il puntato di midollo osseo, vengono isolati i normociti di tre tipi.
I normociti basofili di solito hanno una dimensione di 10-18 micron. Il nucleo è rotondo, denso, non contiene un nucleolo. La struttura del nucleo è più grossolana di quella del pronormocita, con una netta separazione in basocromatina e ossiclomatina, a seguito della quale il nucleo ha una struttura a ruota. Il citoplasma è basofilo, scuro o azzurro.
Il mielogramma normalmente contiene l'1,4-4,6% di normociti basofili.
I normociti policromatofili sono di dimensioni inferiori rispetto al basofilo - 9-12 micron. La forma è rotonda o ovale. Il nucleo è denso. La struttura a forma di ruota del nucleo è conservata, ma in essa sono già noti cambiamenti picnotici, espressi in misura maggiore o minore. Il citoplasma delle cellule, accumulando emoglobina, percepisce vernici acide e, a seconda del grado di saturazione con emoglobina, acquisisce un colore dal blu grigiastro al rosa grigiastro - policromatophilia.
Il mielogramma di una persona sana contiene l'8,9-16,9% dei normociti policromatofili.
I normociti ossifili sono il più piccolo dei normociti, che misurano 7-10 micron. A seconda del grado di maturazione cellulare, il rapporto citoplasmatico nucleare è diverso. In una cellula più matura, il nucleo occupa meno spazio a causa di rughe o picnosi. Il nucleo è denso, compatto, approssimativamente picnotico, situato eccentricamente. Il citoplasma è ortocromico, rosa, ben saturo di emoglobina, a volte contiene particelle staccate vicino al nucleo: corpi jolly. Nella fase del normocita ossifilico, il nucleo viene espulso e la cellula si trasforma in un globulo rosso privo di nucleare. Parallelamente al processo di conversione di un normocita in un eritrocita, l'emoglobina si accumula nel citoplasma.
Il mielogramma contiene normalmente 0,8-5,6% di normociti ossifili.
Uno stadio intermedio tra un normocita ossifilico e un eritrocita è un reticolocita.
La morfologia dei reticolociti e dei globuli rossi è presentata nelle sezioni precedenti.
Morfologia delle cellule germinali dei granulociti I mieloblasti sono le cellule originali della serie dei granulociti, spesso rotonde, di forma meno spesso poligonale, di dimensioni 15-16 micron o 15-20 micron. Indipendentemente dalle loro dimensioni, le cellule differiscono nella delicata struttura dei nuclei con una distribuzione uniforme dei filamenti di cromatina che formano una rete finemente loop. Il nucleo contiene 2-5 nucleoli colorati in blu o blu. Il citoplasma blu circonda il nucleo con una piccola cintura, contiene una moderata quantità di granularità azuropilica non specifica non sempre chiaramente visibile, che ha sfumature di transizione dal rosso al viola; Sono state trovate le verghe Auer, potrebbe essere presente la zona perinucleare dell'illuminazione. In tutti i mieloblasti, il rapporto tra nucleo e citoplasma è sostanzialmente spostato a favore del nucleo. Nel normale midollo osseo non si verificano mieloblasti eosinofili e basofili. Il mielogramma di una persona sana contiene lo 0,2-1,7% dei mieloblasti.
promielociti
Come risultato della divisione mitotica e della differenziazione, i mieloblasti passano alla fase successiva dello sviluppo: i promielociti. Queste cellule in una certa misura ripetono ancora le caratteristiche morfologiche dei mieloblasti. Promyelocyte di qualsiasi riga è la cellula più grande, raggiungendo un diametro di 25 micron. Promyelocyte ha la granularità più abbondante. Va notato la diversità nelle dimensioni delle cellule e del citoplasma, nella struttura e nella forma del nucleo, nei nucleoli non sempre chiaramente visibili o nei loro residui, nel grado di saturazione del citoplasma con granularità polimorfica. I nuclei dei promielociti possono essere rotondi, ovali, a forma di fagiolo, spesso situati in modo eccentrico. La struttura dei filamenti di cromatina è più grossolana di quella dei mieloblasti. A volte i nuclei acquisiscono una struttura che è transitoria al prossimo stadio di differenziazione - mielociti: appare un ispessimento dei filamenti di cromatina, il nucleo perde la sua delicata struttura uniforme, la reticolazione. Il citoplasma di varie larghezze, blu, a volte blu nelle cellule più giovani, blu rosato nelle cellule più mature, può essere fumoso, con una granularità azurophilica pronunciata (la cellula è come se fosse cosparsa di pepe), che si trova sul nucleo e nel citoplasma. Il mielogramma di una persona sana contiene 1,0-4,1% di promielociti neutrofili.
mielociti
I mielociti raggiungono una dimensione di 13-15 micron o più, i nuclei possono essere rotondi, ovali, con forme irregolari, situati sia centralmente che eccentricamente. La struttura del nucleo è caratterizzata dall'alternanza di siti scuri (basicromatina) e chiari (ossicromatina), che distingue i mielociti dai promielociti e dai mieloblasti. I mielociti materni hanno una struttura più delicata del nucleo. Le singole cellule contengono singoli nucleoli. Il rapporto citoplasmatico nucleare viene spostato a favore del nucleo. Il citoplasma nei mielociti neutrofili maturi è violetto-rosato, in basofilo ed eosinofilo - blu. In alcune cellule, il citoplasma ha regioni basofile lungo la periferia, che si alternano con le normali regioni dei neutrofili. La granularità può essere neutrofila, eosinofila e basofila. La granularità neutrofila è di dimensioni diverse. La granularità eosinofila riempie il citoplasma della cellula, ha granuli della stessa dimensione, rosa giallastro o giallo dorato. I mielociti basofili contengono grande granularità basofila di diversi calibri, che non riempie molto densamente il citoplasma. Il mielogramma di una persona sana contiene mielociti neutrofili al 7,0-12,2%, 0,6-1,0% - eosinofilo, 0-0,2% - basofilo.
metamielociti
I metamilocociti neutrofili hanno una dimensione cellulare di 10-15 micron. Nuclei a ferro di cavallo o a forma di fagiolo. La struttura del nucleo è più grossolana di quella dei mielociti; non esiste un nucleolo. Il rapporto citoplasmatico nucleare è 1: 1. Il citoplasma di un metamilococita neutrofilo è di colore rosato, eosinofilo - blu pallido, basofilo - bluastro-viola. La granularità ha un colore che dipende dal tipo di metamyelocyte: neutrofilo, eosinofilo, basofilo. Il mielogramma di una persona sana contiene 8,0-15,0% di metamilocociti neutrofili e 0,2-1,5% di eosinofilo.
Granulociti a banda e segmentati
La morfologia della pugnalata e dei granulociti segmentati è presentata sopra.
Il mielogramma di una persona sana contiene:
- 12,8-23,7% di coltellate di neutrofili;
- 13,1-24,1% di neutrofili segmentati;
- 52,7-68,9% di tutti gli elementi neutrofili;
- 0,5-5,8% di eosinofili di tutte le generazioni;
- 0-0,5% di basofili di tutte le generazioni.
Morfologia delle cellule monocitiche
Monoblasty
Le cellule iniziali della serie monocitica sono monoblasti. Si tratta di cellule grandi, rotonde o poligonali, le loro dimensioni sono superiori a 20 micron, il nucleo è grande, di colore pallido, più spesso arrotondato o allungato, a volte simile a un fagiolo, a lobi, meno variabile rispetto al nucleo dei monociti. Secondo la delicata struttura reticolare e la presenza di 2-3 nucleoli chiaramente visibili, il nucleo dei monoblasti è morfologicamente vicino al nucleo dei mieloblasti. Il citoplasma è più ampio, leggero-basofilo, che distingue i monoblasti dai mieloblasti.
promonocyte
Promonociti delle stesse dimensioni dei monoblasti. Un nucleo più grande dei monoblasti ha una forma ondulata e una curvatura malata. Ci sono ispessimenti nei fili della cromatina dei nuclei, non ci sono nucleoli; il citoplasma, come nei monoblasti, è colorato in vari toni basofili, spesso più chiari, blu-grigiastri, a volte blu, può contenere una piccola granularità azuropilica.
La morfologia dei monociti è descritta sopra. Il mielogramma di una persona sana contiene lo 0,7-3,1% di monociti.
Morfologia delle cellule linfoidi
linfoblasti
La divisione cellulare della fila linfoide in termini di maturità basata su caratteristiche morfologiche è condizionata. Marcata somiglianza morfologica esterna degli elementi linfoidi del sangue e degli organi che formano il sangue.
I linfoblasti sono le cellule progenitrici della serie linfoide. Le dimensioni raggiungono i 20-22 micron. Il nucleo occupa la maggior parte della cellula e ha una forma arrotondata o leggermente ovale. La struttura del nucleo è a maglia morbida (sebbene più grossolana, grumosa rispetto al nucleo mieloblasto), con una distribuzione regolare e uniforme dei filamenti di cromatina.
In alcuni punti, i fili di cromatina formano ispessimenti. Le aree scure della basicromatina passano impercettibilmente nell'ossicromatina. Nel nucleo c'è un grande (raramente 2-3) grande nucleo, delimitato in modo meno netto rispetto ai mieloblasti, situato centralmente o eccentricamente. Il citoplasma è basofilo, relativamente leggero, circonda il nucleo con una cintura stretta, attorno al nucleo vi è una zona periferica più leggera, che non si trasforma sempre uniformemente in una più intensamente colorata. Non c'è granularità nel citoplasma.
prolinfociti
I prolinfociti sono leggermente più piccoli dei linfoblasti, ma più grandi dei linfociti: 12-15 micron. Il nucleo è rotondo o ovale, con una struttura ruvida, a volte con una leggera impressione, occupa gran parte della cellula, è più pallido che nei linfociti, ma più scuro che nei linfoblasti. Le stringhe di basicromatina sono talvolta raccolte in aree più grandi e dense, ma sono disposte in modo più uniforme, senza grumi di grandi dimensioni rispetto a un linfocita. Al centro del nucleo, la maggior parte delle cellule ha l'illuminazione simile a un nucleolo, ma non ci sono nucleoli chiari. Il citoplasma dei prolinfociti, come il citoplasma dei linfociti, circonda il nucleo sotto forma di una cintura stretta o più ampia, è dipinto in azzurro, vicino al nucleo c'è l'illuminazione - la zona perinucleare. A volte la granularità scarsa si trova nel citoplasma sotto forma di granulometrie irregolari di grandi dimensioni - granularità azuropilica. Nel sangue periferico e nel midollo osseo di una persona sana si trovano singoli pro-linfociti.
linfociti
La morfologia dei linfociti è descritta sopra. Nel mielogramma di una persona sana - 4,3 - 13,7% dei linfociti.
Morfologia delle plasmacellule Le plasmacellule sono derivati ​​dei linfociti B, subiscono diverse fasi di sviluppo dal plasmoblasto ai plasmociti e sono coinvolte nella sintesi delle immunoglobuline.
Esplosioni al plasma
Le esplosioni al plasma hanno una dimensione di 16-30 micron. Il nucleo occupa gran parte della cellula, si trova al centro o leggermente eccentrico, ha una struttura delicata, è ricco di basicromatina, che tende ad essere radiale. Il nucleo può contenere uno o più nucleoli di grandi dimensioni (1-2), che non sono sempre chiaramente visibili. Il citoplasma di dimensioni considerevoli, blu intenso. Intorno al nucleo c'è una caratteristica zona di illuminazione. Normalmente, non ci sono plasmoblasti nel midollo osseo.
Proplasmociti (cellule turche)
I proplasmociti (cellule turche) lo sono
forme transitorie dal plasmoblasto alle plasmacellule. Di dimensioni, sono più grandi delle plasmacellule mature, raggiungendo talvolta un diametro di 20 micron. Il nucleo occupa la parte malata della cellula; è più spesso localizzato eccentricamente, ricco di basocromatina. In alcune parti del nucleo viene preservata una delicata struttura a maglie. Il nucleo può contenere un piccolo nucleolo. Il citoplasma è allungato, fortemente basofilo, a volte con una tonalità viola, c'è illuminazione intorno al nucleo, possono esserci vacuoli.
Plasmacellule (cellule di Wien)
I plasmociti (cellule Unna) sono plasmacellule mature di varie forme e dimensioni, da 8 a 20 micron. Il kernel ha un valore quasi costante; di norma, l'entità del citoplasma cambia. Il nucleo è rotondo, spesso ovale, situato eccentricamente, ha una caratteristica struttura a ruota. Il citoplasma è colorato intensamente di blu con una chiara illuminazione attorno al nucleo. Si trovano cellule di grandi dimensioni, con citoplasma più chiaro (grigio-blu) e una zona perinucleare meno pronunciata. Nel citoplasma possono esserci varie dimensioni di vacuoli, situati, di regola, nella parte periferica della cellula e dandole una struttura cellulare. Spesso ci sono plasmacellule multinucleari contenenti 2-4 o più nuclei della stessa o diversa dimensione e un citoplasma con vacuolizzazione pronunciata, che conferisce ai plasmociti una somiglianza con i lipofagi.
Normalmente, le cellule plasmatiche mature nella quantità dello 0,1-1,8% si trovano nella puntura del midollo osseo. Nel sangue periferico, le normali plasmacellule non lo sono.
Morfologia delle cellule megacariocitiche
megacarioblasti
I megacarioblasti sono le cellule madri della serie megacariocitica di circa 20 micron di dimensioni. Il nucleo è rotondo, con una struttura di cromatina a maglie fini, piuttosto grossolana, a volte intrecciata sotto forma di una palla, i nucleoli sono spesso visibili. Il citoplasma è basofilo, granulare, ha l'aspetto di un bordo stretto. I contorni delle cellule sono spesso irregolari, con processi di citoplasma e formazione di placche blu.
Promegakariotsity
I promegakaryocytes sono più grandi dei megakaryoblasts. Il nucleo è grande, ha una struttura più grossolana e una tendenza al polimorfismo: depressioni a forma di baia, linee di allacciamento del nucleo, ecc. Il citoplasma è basofilo, senza grano, sotto forma di un bordo stretto, a volte con processi e formazione di placche blu.
megacariociti
I megacariociti basofili hanno dimensioni leggermente maggiori rispetto ai promegacariociti e due volte più grandi dei megacarioblasti. Il nucleo può essere a forma di baia, con una delicata struttura di basicromatina o più maturo, a più lobi. Il citoplasma di colore blu, a volte con granularità azuropilica, ha l'aspetto di un bordo stretto.
I megacariociti policromatofili sono cellule giganti con un diametro di 40-50 micron. Il nucleo è multi-lama, a volte raggomitolato sotto forma di una palla o costituito da singole palle. La struttura del nucleo è ruvida, spesso si osserva il fenomeno delle rughe: si osserva la picnosi. Il rapporto del citoplasma nucleare è spostato a favore del citoplasma, che è una vasta zona di colore azzurro con una grana di varie tonalità (rossastro, viola chiaro, viola), non sempre uniformemente distanziata. In alcune parti della cellula situate più vicino alla periferia, vengono rilevati ammassi di piccoli granuli circondati da un bordo di citoplasma blu. A volte tali granuli riempiono l'intero citoplasma. Sono simili per dimensioni e struttura alle piastrine del sangue formate. A volte nelle cellule, si può osservare la separazione delle piastrine finite dal citoplasma.
Megacariociti ossifilici - più grandi delle cellule precedenti, con un diametro di 60-70 micron, contengono un nucleo multi-lama, talvolta costituito da frammenti. Abbastanza spesso ci sono cellule multinucleate. Il nucleo diventa viola scuro, nettamente picnotico. Il citoplasma forma una vasta zona, ha una tonalità rosa e contiene abbondante granularità rossastra.
Le forme involutive si formano a seguito dell'invecchiamento dei megacariociti con la graduale separazione del citoplasma e del nucleo durante la formazione delle piastrine. Queste cellule hanno un nucleo rado polisegmentato e un citoplasma rosa pallido con granularità polverosa appena visibile.
Le forme olonucleari possono formarsi da megacariociti involutivi a causa del loro intenso decadimento in placche. In questo caso, i nuclei liberi hanno residui citoplasmatici.
piastrine
La descrizione morfologica delle piastrine è presentata sopra.
Significato clinico
Nella leucemia acuta si osserva un aumento delle cellule di scoppio con la comparsa di forme polimorfiche e brutte con atipia di nuclei, nuclei allargati. In questo caso, il numero di neutrofili maturi ed eritrocariociti è ridotto nel mielogramma. Увеличение миелоидных элементов, главным образом за счет незрелых форм, сочетающееся с небольшим увеличением миелобластов, промиелоцитов, повышением лейкоэритробластического соотношения и уменьшением эритроцитов, является признаком миелопролиферации и особенно выражено при хроническом миелолейкозе.
Увеличение миелоидных элементов и их незрелых форм нередко сопутствует интоксикациям, острым воспалительным процессам, гнойным инфекциям, может быть при шоке, острой кровопотере, гематосаркомах, туберкулезе, раке.
Увеличение лимфоидных элементов в основном за счет зрелых, появление голоядерных форм при значительной редукции эритрокариоцитов является признаком лимфопролиферативных заболеваний (хронический лимфолейкоз, макроглобулинемия Вальденстрема). Увеличение плазматических клеток с изменением их морфологических черт (полиморфизм, двухьядерные формы, изменение окраски цитоплазмы и пр.) характерно для миеломной болезни.
Изменение эритрокариоцитов с резким увеличением их числа и уменьшением лейкоэритробластического соотношения наблюдается при анемиях (постгеморрагические, гемолитические). Изменение морфологических черт эритроидных элементов, появление мегалобластов разных генераций, крупных форм и нейтрофильных миелоцитов, метамиелоцитов, гиперсегментированных нейтрофилов свидетельствует о В12- или фолиево-дефицитных анемиях.
Уменьшение эритроидных форм на фоне снижения общего числа миелокариоцитов с небольшим увеличением бластных клеток, лимфоцитов, плазматических клеток часто может быть проявлением гипопластической анемии. Эти формы малокровия могут протекать и с увеличением эритроидных клеток, появлением атипичных эритробластов. Обнаружение в миелограмме повышенного количества эозинофилов свидетельствует об аллергии, может быть при глистной инвазии, эозинофильных инфильтратах, злокачественных новообразованиях, эозинофильной гранулеме и др. Увеличение моноцитных клеток наблюдается при хроническом моноцитарном лейкозе, хроническом миеломоноцитарном лейкозе, инфекционном мононуклеозе, при хронических инфекциях. Тучные клетки могут обнаруживаться в миелограмме при пигментной крапивнице, в редких случаях тучноклеточного лейкоза (мастоцитома).
Трепанобиопсия костного мозга
Трепанобиопсию костного мозга проводят для диагностики алейкемических форм лейкозов, эритремии, миелофиброза и других миелопролиферативных и лимфопролиферативных заболеваний, при подозрении на гипопластические анемии, метастазы рака в костный мозг и при неясных изменениях пунктата костного мозга. Приготовление срезов костного мозга, их окраску осуществляют в гистологической лаборатории по правилам гистологической обработки костных тканей.

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Морфологический анализ клеток костного мозга с подсчетом миелограммы

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